红细胞渗透脆性实验报告

    实验十八　红细胞渗透脆性试验

    Erythrocyte osmotic fragility test

    一、实验目的

    掌握红细胞渗透脆性试验的原理、操作方法及临床意义。

    二、实验原理

    本实验检测红细胞在不同浓度低渗溶液中抵抗力的大小。在低渗盐水中，水分通过红细胞膜进入细胞内，达到一定程度时，红细胞发生肿胀、破裂、溶解。红细胞渗透脆性（抵抗力）与细胞的表面积和体积的比值及膜的厚度有关：比值越大，膜厚度越小，红细胞对低渗盐水的抵抗力越大，脆性越小；反之，则抵抗力越小，脆性越大。各种病因引起的球形及椭圆形红细胞与正常相比脆性加大。

    三、实验器材

    采血用具、试管、吸管、试管架、离心机等。

    四、实验试剂

    10g／L NaCl溶液、双蒸馏水。

    五、实验方法

    1.试管准备：取12支清洁干燥的试管编号并依次放置试管架上。

    2.添加试剂：按表3‐1（编号）分别加入10g／L NaCl溶液和双蒸馏水，得到不同浓度NaCl溶液。

    3.加入血液：静脉采血2ml，每管加入静脉血1滴，由低到高浓度颠倒混匀。

    4.建立对照：按上述方法，另取12支试管，用正常人血作对照。

    5.结果观察：室温静置2h后观察结果。

    

    表3‐1　红细胞渗透脆性实验的操作

    

    六、注意事项

    1.每次均应做正常对照，被检血样与正常对照相差两管即0.4g／L才有意义。

    2.氯化钠易潮解，临用前在37℃干燥24h。试剂必须现用现配，避免水分蒸发，改变离子浓度。

    3.黄疸及重度贫血患者，结果常较难判断，可取肝素抗凝，离心去血浆，用生理盐水洗涤，配成50％的红细胞悬液再进行实验。

    4.所有使用的器材必须清洁、干燥，避免引起溶血。

    5.血液与NaCl比值为1∶25，血液必须直接注入试剂中，不可沿着管壁滴入，速度要慢。

    6.以非抗凝血为佳。抗凝剂仅能使用肝素，其他抗凝剂会增加离子浓度，改变溶液渗透压。

    七、结果判断

    先从高浓度观察，根据各管中液体颜色和混浊度的不同判断。

    开始溶血：上层液开始呈透明红色且管底有红细胞者。

    完全溶血：溶液为透明红色且管底无红细胞者；必要时可离心后再观察结果。

    八、结果报告

    记录开始溶血管和完全溶血管NaCl溶液浓度。

    九、参考范围

    开始溶血管：4.2～4.6g／L。

    完全溶血管：3.2～3.6g／L。

    十、临床意义

    1.脆性增加　见于遗传性球形红细胞增多症、口形红细胞增多症、椭圆形红细胞增多症（部分病例）、新生儿ABO溶血病、己糖激酶缺乏伴球形红细胞增多症、自身免疫溶血性贫血伴球形红细胞增多症等。

    2.脆性降低　见于正常出生后几个月的婴儿、珠蛋白合成障碍性贫血综合征（称海洋性贫血）、血红蛋白病、缺铁性贫血（IDA）、阻塞性黄疸、肝炎、肝硬化、肝癌等。

    （沈　颖）