培养植物组织培养基础实训

必要器皿_组培快繁生产技术

    实训二　常用仪器、必要器皿、几种主要设备的使用方法

    一、目的和要求

    掌握植物组织培养必需的仪器、器皿、几种主要设备的使用方法，几种常用药剂的配制。

    二、常用仪器

    （一）蒸馏水器（学习操作）

    

    

    （二）手提式高压消毒锅、立式高压消毒锅（学习使用、操作）

    

    

    （三）天平

    1.药物天平（工业天平）、粗天平（精密度1/10）

    2.扭力天平（精密度1/100）

    3.分析天平（精密度1/10000）

    

    

    

    （四）超净工作台（学习、使用、操作）

    

    

    （五）电热干燥箱（烘箱）

    

    

    （六）恒温光照培养箱（学习、操作）

    

    

    （七）电冰箱

    

    （八）显微镜和解剖镜

    1.手提式解剖镜（学习、使用、操作）

    2.立体解剖镜

    3.普通显微镜

    

    （九）酸度测定仪

    1.精密pH4～7试纸

    2.笔型袖珍酸度计

    

    

    三、必要的器皿

    （一）玻璃器皿

    1.培养器皿

    试管、三角烧瓶（锥形瓶）、玻璃组培瓶、培养皿、扁身培养瓶、凹面载玻片。

    2.盛装器皿

    试剂瓶、烧杯。

    3.计量器皿

    量筒、容量瓶、吸管。

    4.其他器皿

    滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。

    （二）金属器械

    1.镊子类

    （1）20～25cm长形镊子（接种或转移愈伤组织）。

    （2）尖端弯曲“枪形”镊子（镊取较小的植物组织）。

    （3）尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥离表皮用）。

    （4）尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物）。

    2.解剖刀和刀类

    （1）眼科用刀、种牛痘疫苗的菱形刀。（切割柔软组织中小细胞团）

    （2）解剖刀（手术刀）。

    （3）双面刀片焊接在玻棒上（切取茎尖用）。

    （4）锋利小刀、大刀和小铁锹。

    3.剪刀类

    解剖剪、眉剪、眼科剪、18～25cm弯头剪、修枝剪。

    4.接种针

    四、几种常用药剂的配制

    （一）尝试用无水乙醇配制不同浓度的酒精

    学习配制70%和75%的酒精浓度。

    （二）消毒剂

    1.20%次氯酸钠溶液

    称取20g次氯酸钠用少许水溶解，100ml水定容。

    2.0.1%升汞（HgCl₂）溶液

    称取0.1gHgCl₂用少许水溶解，100ml水定容。

    （三）洗涤剂

    1.HCl酒精

    100ml95%酒精加入2mlHCl。

    2.硫酸-重铬酸钾洗液

    称取10g重铬酸钾加入蒸馏水90ml，加热溶解冷却后，逐渐加入浓硫酸175ml，放入棕色玻璃瓶备用。（注意：切记不可将盛过酒精、甲醛等药剂的玻璃器皿直接泡入洗液，因为重铬酸钾是一种强的氧化剂，一旦被还原氧化，洗液会变绿，失去洗涤作用。这些器皿必须用自来水冲洗干净并晾干再浸入洗液。）

    （四）1摩尔浓度（mol/L）NaOH和1摩尔浓度（mol/L）HCl配制

    摩尔浓度是指用1升（1000ml）溶液中所含溶质的分子量数来表示的溶液的浓度。用M表示。

    1.NaOH摩尔浓度（M）

    NaOH摩尔质量=分子克数=40g

    1MNaOH是指1000ml溶液中含有40g摩尔质量的NaOH，现要配制100ml1MNaOH，应称取NaOH4g，用少量蒸馏水溶解，定容至100ml。

    2.HCl摩尔浓度

    具体配制酸的摩尔浓度时，应考虑原浓酸的比重。

    

    配制1.0MHCl100ml，量取38%、比重为1.19的HCl8.06ml加蒸馏水，定容至100ml。

    五、实训报告

    1.将本次实训内容补充完成，完成实训报告。

    2.计算配制75%酒精，需要酒精多少毫升、蒸馏水多少毫升。